腺相关病毒（ AAV ）是一种常用于人类基因治疗的重要载体，属于小型无包膜的细小病毒，仅由蛋白质衣壳中包裹的单链 DNA 基因组组成。
AAV 载体可将治疗基因转移到患者身上，以治疗单基因疾病，眼部疾病以及血友病和地中海贫血等临床研究。其具有无致病性、低免疫原性、保留长期基因表达的能力、诱发炎症反应的可能性低等特点，是目前非常有前景的基因治疗载体。
这篇文章简要介绍了 AAV 定量在工艺开发中的重要性，以及 Gator Bio 的创新解决方案是如何填补 AAV 表征的空白。
AAVs 定量的重要性
在 AAV 工艺开发中，准确定量 AAV 基因组和衣壳滴度是确保安全有效剂量的重要步骤，如定量不准确而导致 AAV 载体剂量过高，将产生炎症反应，这对一些敏感器官（ 如眼睛 ）是十分危险的。
传统的 AAV 定量方法包括荧光定量 PCR（ qPCR ），但该方法无法提供任何关于病毒颗粒是否完整的信息。此外，PCR 检测容易受到盐、蛋白质或质粒 DNA 的污染，存在定量不准确的风险。其他已有的免疫检测方法，如 ELISA 和用于衣壳滴度定量的斑点杂交等，都耗时耗力，因此严重阻碍了 AAV 工艺开发周期及其生产。
Gator Bio 用于精确定量的解决方案
Gator Bio 开发了 Gator® Plus ，具有独特的“即插即用”系统，作为高性价比的高通量生物分析工具，以其自动化的方式进行准确、高灵敏度的 AAV 血清型定量。它基于生物膜干涉（ BLI ）技术，使用特异性捕获 AAVX 的纳米抗体探针来结合和定量不同血清型的 AAV 衣壳，包括 AAV 1 - 8 和 10 ，动态范围为 5×106 – 1×1013 vp/mL 。
Gator® Plus 系统具有以下特点：
1. 可兼容工艺开发中使用的各种基质，使用配套探针开发的方法可用于从早期研发阶段到最终产品质量控制的 AAV 定量
2. 8 个通道同时实验，不到 30 分钟即可处理多达 96 个样品，从而实现高通量定量
3. 探针具有良好的再生性能，可重复使用多达 10 次，不会造成任何结合损失，从而节省了大量的处理时间和操作成本
4. 同时与 Gator One 软件整合，可轻松进行数据分析和 AAV 浓度检测，并且还能保存不同 AAV 血清型所需的多条标准曲线，从而节省了重复生成标准曲线的时间，提高处理效率。
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参考文献和延伸阅读
1. Martinez-Fernandezde la Camara, C. et al. Genes 2021, 12, 601. https://doi.org/10.3390/genes12040601
2. Shmidt,A.A. et al. Pharmaceuticals 2022, 15, 23. https://doi.org/10.3390/ph15010023
3. Cui, M. et al.Molecules 2019, 24, 3973; doi:10.3390/molecules24213973
4. https://www.gatorbio.com/wp-content/uploads/2022/04/AAVX-vs-Progen-App-Note.pdf
