生物分子互作分析旨在了解生物分子之间的相互作用以及这些作用产生的结果，这种类型的分析对于医学研究和制药产业十分重要。这篇文章我们阐述了生物分子互作分析的关键原理及其应用。

为什么要研究生物分子相互作用？

生物分子之间的相互作用是许多生物过程的一个关键要素。虽然一些蛋白质本身就起作用，但大多数蛋白质还是以复合物的形式发挥作用，这意味着它们与其他生物分子（ 如金属，脂质，蛋白质和核酸 ）的作用非常重要。

生物分子互作着眼于蛋白质伴侣之间的物理接触以及信号传导和代谢途径的功能趋势。蛋白质相互作用和分子互作是细胞所有生理过程中都固有的，例如：

• 代谢途径的调节
• 细胞运动
• 信号转导
• 环境感知

由于如此多的关键过程都是由生物分子之间的相互作用决定的，因此必须选择正确的分析方法。

表面等离子共振（ SPR ）

SPR 是一种非标记的生物分子互作分析方法，其工作原理是当偏振光以临界角入射到两种不同折射率的介质界面时，可引起金属薄膜内自由电子的共振，使反射光在一定角度内大大减弱。其中，使反射光在一定角度内完全消失的入射角称为 SPR 角。可以通过监测生物反应过程中 SPR 角的动态变化，得到生物分子之间结合和相互作用的特异性信号。

该方法非常适用于表征生物分子互作的结合动力学，可直接检测得到结合和解离速率常数，也不需要额外的试剂、样品制备或测定，即可高精度地分析蛋白质 - 蛋白质互作，还能用于稳态结合分析【1】。

等温滴定量热法（ ITC ）

ITC 是一种用于定量研究一系列生物分子相互作用的方法，可直接测量生物分子结合过程中释放或吸收的热量，实验数据以热谱图形式表示。其主要优点是不需要更换结合分析物，即可在一个实验中确定每个动力学参数。

生物膜干涉技术（ BLI ）

BLI 是一种用于生物分子互作分析的光学生物传感技术，其工作原理是检测可见光在光纤生物传感器末端的光学膜层形成的干涉光谱；简单易用，能提供实时地非标记检测，只需一次测定即可快速得到 k_on ，k_off 和 K_D 。

BLI 技术作为一种非流路系统，可耐受于很多介质，直接应用于粗样品和纯化样品。这意味着它可用于多种研究，无需在不同系统之间交换样品。此外，基于 BLI 原理的仪器占地面积小，不会占用实验室大量的空间，比许多其他技术更具通用性。

BLI 可用于以下领域进行亲和力检测：

• 纳米抗体
• 抗体
• AAV
• 小分子
• 核酸
• 膜蛋白

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